Teses Defendidas - 2025

Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Odontologia

Título: Regulação epigenética de células mesenquimais do ligamento periodontal humano

Autor(a): Luciana Fernandes de Oliveira
Orientador(a): Profa. Dra. Denise Carleto Andia
Data: 11/06/2025

Resumo: Introdução: Células-tronco mesenquimais derivadas do ligamento periodontal (PDLCs) exibem forte capacidade de autorrenovação e diferenciação em múltiplas linhagens, sustentando seu potencial em terapias regenerativas. No entanto, sob condições osteogênicas, as PDLCs podem manifestar fenótipos distintos, regulados por mecanismos epigenéticos que influenciam a acessibilidade da cromatina e a expressão gênica. Este estudo teve como objetivo investigar a regulação epigenética de PDLCs com alto e baixo potencial osteogênico, h-PDLCs e l-PDLCs, respectivamente. Métodos: foram avaliadas a expressão de mRNA por PCR em tempo real, presença de proteína por imunofluorescência, níveis de proteína por Western Blotting e regulação do complexo cromatina/DNA por imunoprecipitação da cromatina em PDLCs cultivadas sob condições basais (DMEM, T0) e após indução osteogênica por 3 e 10 dias (T3 e T10). Resultados: No estado basal, h-PDLCs e l-PDLCs apresentaram perfis transcricionais, proteicos e epigenéticos distintos. Durante a estimulação osteogênica, a expressão de EZH2 aumentou significativamente em l-PDLCs, mas diminuiu em h-PDLCs (p < 0,001), enquanto a expressão de KDM6B diminuiu em l-PDLCs e aumentou em h-PDLCs (p < 0,0001). A análise de RUNX2, RUNX2p57 e SP7 revelou alterações transcricionais dinâmicas: RUNX2p57 e SP7 foram regulados negativamente em l-PDLCs, enquanto RUNX2 foi regulado positivamente em h-PDLCs em T3 e T10. Adicionalmente, l-PDLCs mostraram maior acúmulo da marca repressiva de histonas H3K27me3, com enriquecimento significativo nos promotores de RUNX2 e SP7 em comparação com hPDLCs durante a indução osteogênica (p < 0,05). Conclusão: Estes achados destacam o papel crítico do equilíbrio entre EZH2/KDM6B e da dinâmica de H3K27me3 na regulação do potencial osteogênico de PDLCs e destacam a importância do controle epigenético no comprometimento da linhagem osteogênica.

Palavras-chave: EZH2; KDM6B; H3K27me3; RUNX2; SP7; osteogênese; epigenética; cromatina; PDLCs.
Área de Concentração: Clínica Odontológica.
Linha de Pesquisa: Estudos dos mecanismos relacionados à ocorrência das condições do sistema estomatognático.
Projeto de Pesquisa: Regulação epigenética em células mesenquimais humanas na diferenciação osteogênica.

Título: Longevidade do efeito antinociceptivo de diferentes protocolos de biomodulação em animais induzidos à hipersensibilidade dentinária

Autor(a): Michelle Mazziero Macedo
Orientador(a): Profa. Dra. Cintia Helena Coury Saraceni
Data: 18/02/2025

Resumo: Objetivos: Este trabalho visou avaliar a longevidade dos efeitos antinociceptivos de diferentes protocolos de fotobiomodulação em animais induzidos à hipersensibilidade dentinária (HD) e a correlação com os níveis de β-endorfina. Material e Método:160 ratos tipos wistar, machos, foram divididos em 8 grupos (n=20): Controle (água), HD (isotônico), L1 (660nm), L2 (880nm), L1L2 (ambos), HDL1, HDL2 e HDL1L2. A HD foi induzida por bebida isotônica durante 35 dias. O protocolo de fotobiomodulação foi: 660 e 880 - 1J, 3,5J/cm², 100mW, 10s, 0,028cm², modo contínuo. O comportamento nociceptivo foi avaliado no baseline e imediato de cada tempo: 0, 2, 7 e 14 dias, por meio de escores (0-3), após jato de água a 4°C no molar inferior direito. Foram eutanasiados cinco animais/grupo/tempo e coletados sangue para a quantificação de β-endorfina e mandíbula para análise da superfície dentinária por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Para o grau de dor, foram realizados testes de McNemar, Kruskal-Wallis e Friedman. Para a quantificação de β-endorfina, testes de normalidade e homocedasticidade, seguido de ANOVA e para correlação, Teste de Spearman. Resultados: Os resultados apontaram redução estatisticamente significante da dor ao longo do tempo em todos os protocolos de irradiação, sem diferença estatística entre eles, com maior redução em 7 e 14 dias (semelhantes entre si) em comparação com 0 e 2 dias (semelhantes entre si). A MEV mostrou exposição tubular nos grupos HD. Houve aumento da concentração de β-endorfina nos grupos irradiados, em todos os tempos e relação negativa moderada entre a sua concentração e o grau de dor. Conclusões: Os resultados sugerem que a aplicação da FBM com laser vermelho (660nm), infravermelho (880nm) ou sua associação promoveu efeito antinociceptivo em modelo animal de HD, possivelmente mediado pelo aumento na concentração plasmática de β-endorfina.

Palavras-chave: Hipersensibilidade dentinária; Dor; fotobiomodulação; Neurotransmissor.
Área de Concentração: Clínica Odontológica.
Linha de Pesquisa: Estudos dos mecanismos relacionados à ocorrência das condições do sistema estomatognático.
Projeto de Pesquisa: Estudo dos marcadores biológicos, expressão gênica e fatores comportamentais relacionados à nocicepção de lesões que acometem os elementos dentais.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Aplicação do laser na área da saúde.